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        Technical articles技術文章
        
          
        首頁 > 技術文章 > takara一步法RT-qPCR說明書
        
          
        
			        
        
       	  
        takara一步法RT-qPCR說明書
        
           
        
  　更新時間：2024-12-11    點擊量：921
         
        
          
        
        	
        一、產(chǎn)品目錄表
        一步法RT-qPCR探針法檢測試劑盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
        品牌
        Code No.
        產(chǎn)品名稱
        包裝量
        價格（元）
        Takara
        RR600A
        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix
        200 Rxns
        詳詢
        Takara
        RR600B (A × 5)
        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix
        200 Rxns × 5
        詳詢
        Takara
        RR601A
        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG
        200 Rxns
        詳詢
        Takara
        RR601B (A × 5)
        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG
        200 Rxns × 5
        詳詢
         
         
         
        image.png

        二、產(chǎn)品特點 
        · wan全premix型、操作簡單、probe法One Step RT-qPCR。
        · zuo        越的抗反應阻礙物能力、粗提樣品可以使用本產(chǎn)品
        · 新增UNG版本，可防止假陽性產(chǎn)生
        ■ 制品內容
        One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A，200次，25 μl反應體系)
        1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix（2×）
        625 μl × 4
        2. RNase Free Water
        1.25 ml × 2
        3. ROX Reference Dye（50×conc.）*
        100 μl
        4. ROX Reference Dye II（50×conc.）*
        100 μl

        One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A，200次，25 μl反應體系)
        1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG（2×）
        625 μl × 4
        2. RNase Free Water
        1.25 ml × 2
        3. ROX Reference Dye（50×conc.）*
        100 μl
        4. ROX Reference Dye II（50×conc.）*
        100 μl

        * 使用Applied Biosystems Real-Time PCR儀器等，需要進行孔與孔之間的熒光信號校正時添加該試劑。

        ◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的儀器
        Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System
        StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
        ◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的儀器
        Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
        ◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的儀器
        Thermal Cycler Dice Real Time System系列
        LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
        CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)

         
        ■ 制品說明

         image.png

        反應阻害物耐受實驗









        image.png 


        圖1．阻害物耐受實驗





        在反應液中添加5種反應阻害物，分別使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix、Takara以往產(chǎn)品及其他公司的產(chǎn)品進行阻害物質耐受實驗。結果表明，使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對添加各種阻害物質和無添加組比較，Ct值之間的差值很小，顯示該制品對于各種阻害物具有很高的耐受性。





        target
        Human ACTB基因
        探針
        Takara qPCR Probe
         





        image.png 


        圖2．Multiplex反應的再現(xiàn)性





        以Human HeLa Cell Total RNA 1 pg～100 ng為模板，使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對ACTB、GAPDH、PPIA、YWHAZ基因進行multiplex表達分析。對于所有目標序列，滿足R2＞0.99。



         





        Standard


        - Actin E = 97.1％ R2= 0.996 Slope=-3.393 y-int=33.278


        - YWHAZ E = 95.6％ R2= 0.997 Slope=-3.433 y-int=35.528


        - GAPDH E = 100.6％ R2= 1.000 Slope=-3.307 y-int=35.400


        - PPIA E = 97.1％ R2= 0.999 Slope=-3.395 y-int=33.800




             TAKARA代理——天津益元利康生物科技有限公司，如需，請聯(lián)系。

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